Метод ПЦР для выявления ВПЧ: в каких случаях и как выполняется анализ

Носителями вируса папилломы человека является почти половина населения Земли. У большинства инфицированных людей он никак не проявляется. Клинические признаки зависят от разновидности ВПЧ. Ученые выявили уже около 100 видов, среди которых есть неопасные представители и те, что провоцируют развитие злокачественных опухолей. Чтобы определить вид возбудителя, нужно сделать анализ ПЦР на ВПЧ.

Описание метода ПЦР

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, — метод лабораторного исследования биологического материала. Он помогает выявить ДНК папилломавируса: подтверждает наличие ВПЧ, определяет количество микроорганизмов в организме и тип возбудителя. Анализ основан на полимеризации, многократном удвоении полученного участка ДНК. Это довольно точное и информативное исследование, по результатам которого специалист может назначить эффективное лечение, спрогнозировать риск для здоровья и жизни пациента.

Для того чтобы выполнить анализ, нужно взять соскоб слизистой оболочки цервикального канала у женщин, эпителия или поверхности головки полового члена, уретры у мужчин.

Показания к проведению анализа методом ПЦР

Врач назначит пациенту пройти ПЦР для диагностики ВПЧ-инфекции при следующих ситуациях:

1. Скрининг (гинекологическое обследование) женщин репродуктивного возраста для выявления штаммов вируса, вызывающих рак шейки матки. Скрининг ПЦР на ВПЧ ВКР — важный способ ранней диагностики онкологических заболеваний женской половой системы.
2. Выявление причины неоплазии в области шейки матки, обнаруженной при цитологическом исследовании.
3. При наличии бородавок, папиллом на коже любой части тела, слизистых, остроконечных кондилом — на гениталиях.
4. Контроль при положительном предыдущем исследовании на ВПЧ высокого онкогенного риска, даже если нет никаких симптомов поражения вирусом. Женщине нужно сдавать анализы с определенной периодичностью, определяемой лечащим врачом.
5. Наблюдение пациенток, вылеченных от злокачественных новообразований шейки матки.
6. Выявление папилломавирусной инфекции во время планирования беременности.

Подготовка к проведению обследования методом ПЦР

Чтобы получить достоверный результат, следует правильно подготовиться к исследованию.

Специалисты советуют придерживаться нескольких правил подготовки к сдаче анализа:

1. Исключить половые контакты за 3 суток до исследования.
2. Нельзя употреблять алкоголь несколько дней (3—4).
3. Провести обычные гигиенические процедуры с вечера перед днем обследования.
4. Примерно 2 часа непосредственно перед взятием биоматериала не следует допускать мочеиспускания, особенно мужчинам.
5. Анализ проводится не ранее, чем через 30 дней после прекращения терапии какими-либо антибактериальными или противовирусными препаратами.
6. Местное лечение (мазями, вагинальными суппозиториями, гелями) завершают за 2 недели до взятия мазков для выполнения ПЦР.
7. Два дня до исследования нежелательно проводить спринцевание влагалища, кольпоскопию, УЗИ интравагинальным датчиком.
8. Женщинам рекомендуется брать материал на анализ на этапе фолликулярной фазы менструального цикла (первые 2 недели цикла), не раньше чем через 3—5 суток после прекращения менструаций.

Процедура проведения ПЦР

У женщин соскоб берется после осмотра гинекологом на кресле. У мужчин мазок из уретры берет уролог.

Этапы процедуры:

1. Стерильным физраствором врач обрабатывает шейку матки женщины или головку полового члена у мужчины.
2. Внутрь канала шейки матки на глубину примерно 10 мм вводится специальный инструмент, похожий на маленькую щеточку, и несколькими вращательными движениями проводится забор тканей слизистого эпителия. У мужчин щеточку вводят внутрь мочеиспускательного канала почти на 4 см.
3. Цитологическая щеточка с биоматериалом осторожно извлекается из цервикального канала или уретры и помещается в заранее подготовленную пробирку со специальной питательной средой на 15 секунд. Там щеточку так же вращают несколько раз, отжимают о стенки пробирки и извлекают, а пробирку с материалом плотно закупоривают и отправляют в лабораторию. Хранить материал до анализа можно не более 2 дней.

Куда обратиться для обследования ПЦР

ПЦР проводится в лабораториях любого медицинского учреждения — государственного или частного. Отделение лабораторной диагностики должно иметь специальную аппаратуру.

Для получения направления на исследование обращаются за консультацией к специалисту — гинекологу, урологу, дерматологу, онкодерматологу в поликлинику по месту жительства или частный медицинский центр. Врач проведет опрос, осмотр пациента. По результатам беседы специалист узнает жалобы больного, выявляет факторы риска инфицирования ВПЧ (иммунодефициты, раннее начало половой жизни, беспорядочный ее характер и другие).



При осмотре пациента можно обнаружить новообразования (бородавки, папилломы) кожных покровов и слизистых оболочек носа, рта, половых органов. Женщинам обязательно проводится гинекологический осмотр с помощью зеркал. При подозрении на злокачественную природу наростов на шейке матки, стенках влагалища и других участках требуется сделать дополнительные исследования (кольпоскопия, цитология и обязательно — ПЦР для выявления ВПЧ).

Виды методики проведения ПЦР

Существует несколько вариантов полимеразно-цепной реакции на ВПЧ. Выбор методики исследования проводится врачом.

Качественный способ

Этот вариант анализа позволяет обнаружить папилломавирус высокого канцерогенного риска (ВПЧ ВКР). Он широко распространен, применяется, как скрининговое обследование для установления факта носительства одного или нескольких видов вируса. Но тип микроорганизма таким методом исследования определить не удастся.

Генотипирование

Данная разновидность полимеразной цепной реакции способствует точному определению штамма вируса. Генотипирование помогает выявить онкогенные типы вируса (16, 18), которые способны вызвать цервикальный рак. Раннее выявление этих микроорганизмов помогает составить план дальнейшего обследования, лечения, спрогнозировать течение болезни, вероятность развития осложнений.

Комбинированная методика

Такой вариант анализа — это качественный способ выявления указанных в направлении вирусов с генотипированием конкретного папилломавируса (онкогенного 16-го типа).

Количественное определение без генотипирования

Судя по названию, эта разновидность ПЦР позволяет специалисту определить концентрацию опасных вирусов (вызывающих развитие злокачественных новообразований) в представленном биоматериале. Чаще других пытаются обнаружить 16-й и 18-й типы ВПЧ.

Диагностика ПЦР перед беременностью

При планировании беременности обязательно нужно сдать анализы, выявляющие носительство папилломавируса.

При вынашивании ребенка иммунитет женщины, как правило, сильно снижается, что приводит к активизации всех латентно протекающих инфекций, в том числе — папилломавирусной. Поэтому у беременных часто появляются всевозможные бородавки, папилломы, а также остроконечные кондиломы половых органов, что может привести к заражению ВПЧ ребенка во время естественных родов. У новорожденного, особенно при недоношенности, врожденных пороках развития, иммунодефицитах, инфицирование папилломавирусом 6, 11-го типа нередко приводит к опасному папилломатозу гортани.

Перед тем как забеременеть, женщине рекомендуют пройти исследование ПЦР. При обнаружении штаммов, обладающих высокой онкогенностью, назначается курс лечения, после которого — повторная (контрольная) ПЦР для выявления ВПЧ. После подтверждения отсутствия клинически значимой концентрации ВПЧ врач дает разрешение на вынашивание беременности.

Расшифровка результатов анализа ПЦР

ПЦР выполняется примерно 1—2 дня. Результат качественного варианта ПЦР бывает положительными или отрицательными, что свидетельствует о присутствии или отсутствии в исследуемом материале ДНК возбудителей, указанных на бланке направления.

При генотипировании результат исследования бывает положительным или отрицательным по отношению ко всем разновидностям папилломавируса, указанным в бланке.

При комбинированном способе ПЦР возможны несколько вариантов результата:

• отрицательный: отсутствие всех указанных типов микроорганизма,
• положительный, в том числе и на 16-й тип: обнаруживается ВПЧ 16-го типа, плюс 1 или несколько других видов вируса, указанных на бланке,
• положительный только в отношении вируса 16-го типа.

По результатам такой методики ПЦР, как количественное определение ВПЧ без генотипирования, выявляют соотношение микроорганизмов к 100000 клеток представленного материала:

• менее 3 вирусов на 100 тысяч клеток — низкая концентрация возбудителя и малая вероятность развития онкологических патологий,
• от 3 до 5 — количество микроорганизмов клинически значимо, высока вероятность предраковых состояний, рака шейки матки,
• более 5 микроорганизмов на 100 тысяч клеток — высокое содержание ВПЧ и высокий риск предрака цервикального эпителия и перехода его в рак.

Результат выдается пациенту или отправляется к лечащему врачу, давшему направление, не позже чем через неделю после взятия биоматериала.

Интерпретировать результаты должен только специалист, который назначит лечение в зависимости от полученных данных. Самостоятельно расшифровкой результатов заниматься нельзя.

При обнаружении на своем теле каких-либо новообразований обязательно следует обратиться на прием к дерматологу, гинекологу или урологу, в зависимости от локализации образований на коже или на слизистых.

Во избежание развития серьезных, опасных для жизни заболеваний, например, рака шейки матки, необходима своевременное выявление возбудителя этих болезней — канцерогенных типов вируса папилломы человека.

Самым информативным методом диагностики, оценивающим количество возбудителей в организме и определяющим тип ВПЧ, является полимеразная цепная реакция.